Νέα

Σας ευχαριστούμε που επισκεφθήκατε το Nature.com. Η έκδοση του προγράμματος περιήγησης που χρησιμοποιείτε έχει περιορισμένη υποστήριξη για CSS. Για την καλύτερη δυνατή εμπειρία, συνιστούμε να χρησιμοποιήσετε ένα ενημερωμένο πρόγραμμα περιήγησης (ή να απενεργοποιήσετε τη λειτουργία συμβατότητας στον Internet Explorer). Εν τω μεταξύ, για να διασφαλίσουμε τη συνεχή υποστήριξη, θα εμφανίζουμε τον ιστότοπο χωρίς στυλ και JavaScript.
Η συνεχώς αυξανόμενη ζήτηση για επικοινωνία μέσω κινητής τηλεφωνίας έχει οδηγήσει στη συνεχή εμφάνιση ασύρματων τεχνολογιών (G), οι οποίες μπορεί να έχουν διαφορετικές επιπτώσεις στα βιολογικά συστήματα. Για να το ελέγξουμε αυτό, εκθέσαμε αρουραίους σε έκθεση ενός κεφαλιού σε ένα ηλεκτρομαγνητικό πεδίο (EMF) 4G μακροπρόθεσμης εξέλιξης (LTE)-1800 MHz για 2 ώρες. Στη συνέχεια, αξιολογήσαμε την επίδραση της οξείας νευροφλεγμονής που προκαλείται από λιποπολυσακχαρίτες στην χωρική κάλυψη της μικρογλοίας και στην ηλεκτροφυσιολογική νευρωνική δραστηριότητα στον πρωτογενή ακουστικό φλοιό (ACx). Ο μέσος όρος SAR στο ACx είναι 0,5 W/kg. Οι πολυμοναδικές ηχογραφήσεις δείχνουν ότι το LTE-EMF προκαλεί μείωση της έντασης της απόκρισης σε καθαρούς τόνους και φυσικές φωνητικές εκφωνήσεις, ενώ αυξάνει το ακουστικό κατώφλι για χαμηλές και μεσαίες συχνότητες. Η ανοσοϊστοχημεία Iba1 δεν έδειξε αλλαγές στην περιοχή που καλύπτεται από μικρογλοιακά σώματα και διεργασίες. Σε υγιείς αρουραίους, η ίδια έκθεση στο LTE δεν προκάλεσε αλλαγές στην ένταση απόκρισης και τα ακουστικά κατώφλια. Τα δεδομένα μας δείχνουν ότι η οξεία νευροφλεγμονή ευαισθητοποιεί τους νευρώνες στο LTE-EMF, με αποτέλεσμα την αλλοιωμένη επεξεργασία των ακουστικών ερεθισμάτων στο ACx.
Το ηλεκτρομαγνητικό περιβάλλον της ανθρωπότητας έχει αλλάξει δραματικά τις τελευταίες τρεις δεκαετίες λόγω της συνεχούς επέκτασης των ασύρματων επικοινωνιών. Επί του παρόντος, περισσότερα από τα δύο τρίτα του πληθυσμού θεωρούνται χρήστες κινητών τηλεφώνων (MP). Η μεγάλης κλίμακας εξάπλωση αυτής της τεχνολογίας έχει προκαλέσει ανησυχίες και συζητήσεις σχετικά με τις δυνητικά επικίνδυνες επιπτώσεις των παλμικών ηλεκτρομαγνητικών πεδίων (EMF) στην περιοχή ραδιοσυχνοτήτων (RF), τα οποία εκπέμπονται από MP ή σταθμούς βάσης και κωδικοποιούν τις επικοινωνίες. Αυτό το ζήτημα δημόσιας υγείας έχει εμπνεύσει μια σειρά από πειραματικές μελέτες αφιερωμένες στη διερεύνηση των επιπτώσεων της απορρόφησης ραδιοσυχνοτήτων σε βιολογικούς ιστούς1. Ορισμένες από αυτές τις μελέτες έχουν αναζητήσει αλλαγές στη δραστηριότητα του νευρωνικού δικτύου και στις γνωστικές διαδικασίες, δεδομένης της εγγύτητας του εγκεφάλου με πηγές RF υπό την εκτεταμένη χρήση των MP. Πολλές αναφερόμενες μελέτες ασχολούνται με τις επιπτώσεις των σημάτων με παλμική διαμόρφωση που χρησιμοποιούνται στο παγκόσμιο σύστημα κινητής επικοινωνίας δεύτερης γενιάς (2G) ή στα συστήματα πολλαπλής πρόσβασης ευρείας ζώνης με διαίρεση κώδικα (WCDMA)/τρίτης γενιάς καθολικών κινητών τηλεπικοινωνιών (WCDMA/3G UMTS)2,3,4,5. Λίγα είναι γνωστά για τις επιπτώσεις των σημάτων ραδιοσυχνοτήτων που χρησιμοποιούνται στις κινητές υπηρεσίες τέταρτης γενιάς (4G), οι οποίες βασίζονται σε ένα πλήρως ψηφιακό πρωτόκολλο Διαδικτύου. τεχνολογία που ονομάζεται τεχνολογία Long Term Evolution (LTE). Η υπηρεσία LTE για κινητά, η οποία ξεκίνησε το 2011, αναμένεται να φτάσει τα 6,6 δισεκατομμύρια συνδρομητές LTE παγκοσμίως τον Ιανουάριο του 2022 (GSMA: //gsacom.com). Σε σύγκριση με τα συστήματα GSM (2G) και WCDMA (3G) που βασίζονται σε σχήματα διαμόρφωσης ενός φορέα, το LTE χρησιμοποιεί Ορθογώνια Πολυπλεξία Διαίρεσης Συχνότητας (OFDM) ως βασική μορφή σήματος6. Σε παγκόσμιο επίπεδο, οι υπηρεσίες κινητής τηλεφωνίας LTE χρησιμοποιούν μια σειρά από διαφορετικές ζώνες συχνοτήτων μεταξύ 450 και 3700 MHz, συμπεριλαμβανομένων των ζωνών 900 και 1800 MHz που χρησιμοποιούνται επίσης στο GSM.
Η ικανότητα της έκθεσης σε ραδιοσυχνότητες (RF) να επηρεάζει τις βιολογικές διεργασίες καθορίζεται σε μεγάλο βαθμό από τον ειδικό ρυθμό απορρόφησης (SAR) που εκφράζεται σε W/kg, ο οποίος μετρά την ενέργεια που απορροφάται στον βιολογικό ιστό. Οι επιδράσεις της οξείας 30λεπτης έκθεσης του κεφαλιού σε σήματα LTE 2,573 GHz στην παγκόσμια δραστηριότητα του νευρωνικού δικτύου διερευνήθηκαν πρόσφατα σε υγιείς εθελοντές. Χρησιμοποιώντας fMRI σε κατάσταση ηρεμίας, παρατηρήθηκε ότι η έκθεση σε LTE μπορεί να προκαλέσει αυθόρμητες αργές διακυμάνσεις συχνότητας και αλλοιώσεις στην ενδο- ή διαπεριφερειακή συνδεσιμότητα, ενώ τα επίπεδα μέγιστης χωρικής SAR κατά μέσο όρο σε 10 g ιστού εκτιμήθηκε ότι κυμαίνονταν μεταξύ 0,42 και 1,52 W/kg, σύμφωνα με τα θέματα 7, 8, 9. Η ανάλυση EEG υπό παρόμοιες συνθήκες έκθεσης (διάρκεια 30 λεπτών, εκτιμώμενο μέγιστο επίπεδο SAR 1,34 W/kg χρησιμοποιώντας ένα αντιπροσωπευτικό μοντέλο ανθρώπινης κεφαλής) κατέδειξε μειωμένη φασματική ισχύ και ημισφαιρική συνοχή στις ζώνες άλφα και βήτα. Ωστόσο, δύο άλλες μελέτες που βασίζονται σε ανάλυση EEG διαπίστωσαν ότι 20 ή 30 λεπτά έκθεσης στο κεφάλι LTE, με μέγιστα τοπικά επίπεδα SAR να ορίζονται σε περίπου 2 W/kg, είτε δεν είχαν ανιχνεύσιμη επίδραση11 ή είχαν ως αποτέλεσμα τη μείωση της φασματικής ισχύος στη ζώνη άλφα, ενώ η γνωστική λειτουργία δεν άλλαξε, όπως αξιολογήθηκε με τη δοκιμή Stroop12. Σημαντικές διαφορές βρέθηκαν επίσης στα αποτελέσματα μελετών EEG ή γνωστικών μελετών που εξετάζουν ειδικά τις επιπτώσεις της έκθεσης σε ηλεκτρομαγνητικά πεδία GSM ή UMTS. Πιστεύεται ότι προκύπτουν από διακυμάνσεις στον σχεδιασμό της μεθόδου και στις πειραματικές παραμέτρους, συμπεριλαμβανομένου του τύπου και της διαμόρφωσης σήματος, της έντασης και της διάρκειας της έκθεσης, ή από την ετερογένεια σε ανθρώπους ως προς την ηλικία, την ανατομία ή το φύλο.
Μέχρι στιγμής, λίγες μελέτες σε ζώα έχουν χρησιμοποιηθεί για να προσδιοριστεί ο τρόπος με τον οποίο η έκθεση σε σηματοδότηση LTE επηρεάζει τη λειτουργία του εγκεφάλου. Πρόσφατα έχει αναφερθεί ότι η συστηματική έκθεση σε αναπτυσσόμενα ποντίκια από το ύστερο εμβρυϊκό στάδιο έως τον απογαλακτισμό (30 λεπτά/ημέρα, 5 ημέρες/εβδομάδα, με μέσο SAR ολόκληρου του σώματος 0,5 ή 1 W/kg) είχε ως αποτέλεσμα αλλοιωμένες κινητικές και όρεξης συμπεριφορές στην ενηλικίωση 14. Η επαναλαμβανόμενη συστηματική έκθεση (2 εκτάρια την ημέρα για 6 εβδομάδες) σε ενήλικους αρουραίους βρέθηκε ότι προκαλεί οξειδωτικό στρες και μειώνει το πλάτος των οπτικών προκλητών δυναμικών που λαμβάνονται από το οπτικό νεύρο, με μέγιστο SAR που εκτιμάται ότι είναι μόλις 10 mW/kg 15.
Εκτός από την ανάλυση σε πολλαπλές κλίμακες, συμπεριλαμβανομένων των κυτταρικών και μοριακών επιπέδων, τα μοντέλα τρωκτικών μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τη μελέτη των επιπτώσεων της έκθεσης σε ραδιοσυχνότητες (RF) κατά τη διάρκεια ασθενειών, όπως είχε προηγουμένως επικεντρωθεί στην ηλεκτρομαγνητική ακτινοβολία GSM ή WCDMA/3G UMTS στο πλαίσιο οξείας νευροφλεγμονής. Μελέτες έχουν δείξει τις επιπτώσεις των επιληπτικών κρίσεων, των νευροεκφυλιστικών ασθενειών ή των γλοιωμάτων 16,17,18,19,20.
Τα τρωκτικά στα οποία έχει γίνει ένεση λιποπολυσακχαρίτη (LPS) αποτελούν ένα κλασικό προκλινικό μοντέλο οξείας νευροφλεγμονώδους απόκρισης που σχετίζεται με καλοήθεις μολυσματικές ασθένειες που προκαλούνται από ιούς ή βακτήρια και επηρεάζουν την πλειονότητα του πληθυσμού κάθε χρόνο. Αυτή η φλεγμονώδης κατάσταση οδηγεί σε μια αναστρέψιμη ασθένεια και καταθλιπτικό σύνδρομο συμπεριφοράς που χαρακτηρίζεται από πυρετό, απώλεια όρεξης και μειωμένη κοινωνική αλληλεπίδραση. Τα φαγοκύτταρα του ΚΝΣ, όπως η μικρογλοία, είναι βασικά κύτταρα-τελεστές αυτής της νευροφλεγμονώδους απόκρισης. Η θεραπεία τρωκτικών με LPS πυροδοτεί την ενεργοποίηση της μικρογλοίας που χαρακτηρίζεται από αναδιαμόρφωση του σχήματος και των κυτταρικών διεργασιών τους και βαθιές αλλαγές στο προφίλ των μεταγραφωμάτων, συμπεριλαμβανομένης της ανοδικής ρύθμισης γονιδίων που κωδικοποιούν προφλεγμονώδεις κυτοκίνες ή ένζυμα, τα οποία επηρεάζουν τα νευρωνικά δίκτυα. Δραστηριότητες 22, 23, 24.
Μελετώντας τις επιδράσεις μιας μόνο έκθεσης κεφαλής 2 ωρών σε ηλεκτρομαγνητικό πεδίο GSM-1800 MHz σε αρουραίους που έλαβαν LPS, διαπιστώσαμε ότι η σηματοδότηση GSM πυροδοτεί κυτταρικές αποκρίσεις στον εγκεφαλικό φλοιό, επηρεάζοντας την γονιδιακή έκφραση, τη φωσφορυλίωση του γλουταμινικού υποδοχέα, την νευρωνική μετα-προκλητή πυροδότηση και τη μορφολογία της μικρογλοίας στον εγκεφαλικό φλοιό. Αυτές οι επιδράσεις δεν ανιχνεύθηκαν σε υγιείς αρουραίους που έλαβαν την ίδια έκθεση σε GSM, γεγονός που υποδηλώνει ότι η νευροφλεγμονώδης κατάσταση που προκαλείται από LPS ευαισθητοποιεί τα κύτταρα του ΚΝΣ στην σηματοδότηση GSM. Εστιάζοντας στον ακουστικό φλοιό (ACx) αρουραίων που έλαβαν LPS, όπου ο τοπικός SAR ήταν κατά μέσο όρο 1,55 W/kg, παρατηρήσαμε ότι η έκθεση σε GSM είχε ως αποτέλεσμα την αύξηση του μήκους ή της διακλάδωσης των μικρογλοιακών αποφύσεων και τη μείωση των νευρωνικών αποκρίσεων που προκαλούνται από καθαρούς τόνους και. Φυσική Διέγερση 28.
Στην παρούσα μελέτη, στόχος μας ήταν να εξετάσουμε εάν η έκθεση μόνο στο κεφάλι σε σήματα LTE-1800 MHz θα μπορούσε επίσης να μεταβάλει τη μορφολογία των μικρογλοιακών κυττάρων και τη νευρωνική δραστηριότητα στο ACx, μειώνοντας την ισχύ της έκθεσης κατά τα δύο τρίτα. Δείχνουμε εδώ ότι η σηματοδότηση LTE δεν είχε καμία επίδραση στις μικρογλοιακές διεργασίες, αλλά εξακολουθούσε να προκαλεί σημαντική μείωση της φλοιώδους δραστηριότητας που προκαλείται από τον ήχο στο ACx αρουραίων που έλαβαν LPS με τιμή SAR 0,5 W/kg.
Δεδομένων προηγούμενων στοιχείων ότι η έκθεση στο GSM-1800 MHz άλλαξε τη μορφολογία της μικρογλοίας υπό προφλεγμονώδεις συνθήκες, διερευνήσαμε αυτό το φαινόμενο μετά από έκθεση σε σηματοδότηση LTE.
Σε ενήλικους αρουραίους εγχύθηκε LPS 24 ώρες πριν από την εικονική έκθεση μόνο στο κεφάλι ή την έκθεση σε LTE-1800 MHz. Κατά την έκθεση, νευροφλεγμονώδεις αποκρίσεις που ενεργοποιούνται από LPS δημιουργήθηκαν στον εγκεφαλικό φλοιό, όπως φαίνεται από την ανοδική ρύθμιση των προφλεγμονωδών γονιδίων και τις αλλαγές στη μορφολογία της φλοιώδους μικρογλοίας (Σχήμα 1). Η ισχύς που εκτέθηκε από την κεφαλή LTE ρυθμίστηκε ώστε να ληφθεί ένα μέσο επίπεδο SAR 0,5 W/kg σε ACx (Σχήμα 2). Για να προσδιοριστεί εάν η μικρογλοία που ενεργοποιήθηκε από LPS ανταποκρίθηκε στην ηλεκτρομαγνητική πεδία LTE, αναλύσαμε φλοιώδεις τομές που χρωματίστηκαν με αντι-Iba1 που επισήμαναν επιλεκτικά αυτά τα κύτταρα. Όπως φαίνεται στο Σχήμα 3α, σε τομές ACx που σταθεροποιήθηκαν 3 έως 4 ώρες μετά την εικονική έκθεση ή την έκθεση σε LTE, η μικρογλοία φαινόταν αξιοσημείωτα παρόμοια, δείχνοντας μια "πυκνή" κυτταρική μορφολογία που προκλήθηκε από την προφλεγμονώδη θεραπεία με LPS (Σχήμα 1). Σε συμφωνία με την απουσία μορφολογικών αποκρίσεων, η ποσοτική ανάλυση εικόνας δεν αποκάλυψε σημαντικές διαφορές στη συνολική επιφάνεια (μη ζευγαρωμένο t-test, p = 0,308) ή στην επιφάνεια (p = 0,196) και πυκνότητα (p = 0,061) ανοσοαντιδραστικότητας Iba1 κατά τη σύγκριση της έκθεσης σε κυτταρικά σώματα χρωματισμένα με Iba 1 σε αρουραίους LTE έναντι ζώων που είχαν εκτεθεί ψευδώς (Εικόνα 3b-d).
Επιδράσεις της ενδοπεριτοναϊκής έγχυσης LPS στη μορφολογία της φλοιώδους μικρογλοίας. Αντιπροσωπευτική όψη της μικρογλοίας σε μια στεφανιαία τομή του εγκεφαλικού φλοιού (ραχιαία-μεσαία περιοχή) 24 ώρες μετά την ενδοπεριτοναϊκή έγχυση LPS ή οχήματος (μάρτυρας). Τα κύτταρα χρωματίστηκαν με αντίσωμα κατά του Iba1 όπως περιγράφηκε προηγουμένως. Η προφλεγμονώδης θεραπεία με LPS είχε ως αποτέλεσμα αλλαγές στη μορφολογία της μικρογλοίας, συμπεριλαμβανομένης της εγγύς πάχυνσης και της αύξησης των βραχέων δευτερογενών κλάδων των κυτταρικών αποφύσεων, με αποτέλεσμα μια "πυκνή" εμφάνιση. Γραμμή κλίμακας: 20 µm.
Δοσιμετρική ανάλυση του ειδικού ρυθμού απορρόφησης (SAR) σε εγκέφαλο αρουραίου κατά την έκθεση σε LTE 1800 MHz. Ένα προηγουμένως περιγραφόμενο ετερογενές μοντέλο φανταστικού αρουραίου και κεραίας βρόχου62 χρησιμοποιήθηκε για την αξιολόγηση του τοπικού SAR στον εγκέφαλο, με κυβικό πλέγμα 0,5 mm3. (α) Συνολική άποψη ενός μοντέλου αρουραίου σε περιβάλλον έκθεσης με κεραία βρόχου πάνω από το κεφάλι και μεταλλικό θερμικό μαξιλαράκι (κίτρινο) κάτω από το σώμα. (β) Κατανομή των τιμών SAR στον ενήλικο εγκέφαλο σε χωρική ανάλυση 0,5 mm3. Η περιοχή που οριοθετείται από το μαύρο περίγραμμα στην οβελιαία τομή αντιστοιχεί στον πρωτεύοντα ακουστικό φλοιό όπου αναλύεται η μικρογλοιακή και νευρωνική δραστηριότητα. Η κλίμακα τιμών SAR με χρωματική κωδικοποίηση ισχύει για όλες τις αριθμητικές προσομοιώσεις που φαίνονται στο σχήμα.
Μικρογλοία εγχυμένη με LPS σε ακουστικό φλοιό αρουραίου μετά από έκθεση σε LTE ή Sham. (α) Αντιπροσωπευτική στοιβαγμένη όψη μικρογλοίας βαμμένης με αντίσωμα αντι-Iba1 σε στεφανιαίες τομές ακουστικού φλοιού αρουραίου που είχε διαποτιστεί με LPS 3 έως 4 ώρες μετά την έκθεση σε Sham ή LTE (έκθεση). Γραμμή κλίμακας: 20 µm. (βδ) Μορφομετρική αξιολόγηση μικρογλοίας 3 έως 4 ώρες μετά την έκθεση σε sham (ανοιχτές κουκκίδες) ή LTE (εκτεθειμένο, μαύρες κουκκίδες). (β, γ) Χωρική κάλυψη (β) του δείκτη μικρογλοίας Iba1 και περιοχές κυτταρικών σωμάτων θετικών για Iba1 (γ). Τα δεδομένα αντιπροσωπεύουν την περιοχή χρώσης αντι-Iba1 κανονικοποιημένη ως προς τον μέσο όρο από ζώα που εκτέθηκαν σε Sham. (δ) Αριθμός κυτταρικών σωμάτων μικρογλοίας βαμμένων με αντι-Iba1. Οι διαφορές μεταξύ των ζώων Sham (n = 5) και LTE (n = 6) δεν ήταν σημαντικές (p > 0,05, μη ζευγαρωμένο t-test). Το πάνω και το κάτω μέρος του πλαισίου, οι άνω και κάτω γραμμές αντιπροσωπεύουν το 25ο-75ο εκατοστημόριο. και το 5-95ο εκατοστημόριο, αντίστοιχα. Η μέση τιμή σημειώνεται με κόκκινο χρώμα στο πλαίσιο.
Ο Πίνακας 1 συνοψίζει τον αριθμό των ζώων και τις καταγραφές πολλαπλών μονάδων που ελήφθησαν στον πρωτεύοντα ακουστικό φλοιό τεσσάρων ομάδων αρουραίων (Sham, Exposed, Sham-LPS, Exposed-LPS). Στα παρακάτω αποτελέσματα, συμπεριλαμβάνουμε όλες τις καταγραφές που παρουσιάζουν σημαντικό φασματικό χρονικό δεκτικό πεδίο (STRF), δηλαδή, αποκρίσεις που προκαλούνται από τόνους τουλάχιστον 6 τυπικές αποκλίσεις υψηλότερες από τους ρυθμούς αυθόρμητης πυροδότησης (βλ. Πίνακα 1). Εφαρμόζοντας αυτό το κριτήριο, επιλέξαμε 266 εγγραφές για την ομάδα Sham, 273 εγγραφές για την ομάδα Exposed, 299 εγγραφές για την ομάδα Sham-LPS και 295 εγγραφές για την ομάδα Exposed-LPS.
Στις επόμενες παραγράφους, θα περιγράψουμε πρώτα τις παραμέτρους που εξάγονται από το φασματικό-χρονικό δεκτικό πεδίο (δηλαδή, την απόκριση σε καθαρούς τόνους) και την απόκριση σε ξενογενείς ειδικές φωνητικές εκφωνήσεις. Στη συνέχεια, θα περιγράψουμε την ποσοτικοποίηση της περιοχής απόκρισης συχνότητας που λαμβάνεται για κάθε ομάδα. Λαμβάνοντας υπόψη την παρουσία "ένθετων δεδομένων"30 στον πειραματικό μας σχεδιασμό, όλες οι στατιστικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με βάση τον αριθμό των θέσεων στη διάταξη ηλεκτροδίων (τελευταία σειρά στον Πίνακα 1), αλλά όλα τα αποτελέσματα που περιγράφονται παρακάτω βασίστηκαν επίσης στον αριθμό των θέσεων σε κάθε ομάδα. Συνολικός αριθμός συλλεχθέντων ηχογραφήσεων πολλαπλών μονάδων (τρίτη σειρά στον Πίνακα 1).
Το Σχήμα 4α δείχνει τη βέλτιστη κατανομή συχνότητας (BF, που προκαλεί μέγιστη απόκριση στα 75 dB SPL) των φλοιωδών νευρώνων που ελήφθησαν σε ζώα που έλαβαν θεραπεία με LPS με Sham και σε ζώα που εκτέθηκαν. Το εύρος συχνοτήτων του BF και στις δύο ομάδες επεκτάθηκε από 1 kHz σε 36 kHz. Η στατιστική ανάλυση έδειξε ότι αυτές οι κατανομές ήταν παρόμοιες (χ2, p = 0,278), υποδηλώνοντας ότι οι συγκρίσεις μεταξύ των δύο ομάδων θα μπορούσαν να γίνουν χωρίς μεροληψία δειγματοληψίας.
Επιδράσεις της έκθεσης σε LTE σε ποσοτικοποιημένες παραμέτρους των φλοιωδών αποκρίσεων σε ζώα που έλαβαν LPS. (α) Κατανομή BF σε φλοιώδεις νευρώνες ζώων που έλαβαν LPS που εκτέθηκαν σε LTE (μαύρο) και εικονικά εκτεθειμένων σε LTE (λευκό). Δεν υπάρχει διαφορά μεταξύ των δύο κατανομών. (bf) Η επίδραση της έκθεσης σε LTE σε παραμέτρους που ποσοτικοποιούν το φασματικό χρονικό δεκτικό πεδίο (STRF). Η ισχύς απόκρισης μειώθηκε σημαντικά (*p < 0,05, μη ζευγαρωμένο t-test) τόσο στο STRF (συνολική ισχύς απόκρισης) όσο και στις βέλτιστες συχνότητες (b,c). Διάρκεια απόκρισης, εύρος ζώνης απόκρισης και σταθερά εύρους ζώνης (df). Τόσο η ισχύς όσο και η χρονική αξιοπιστία των αποκρίσεων στις φωνητικές εκφωνήσεις μειώθηκαν (g, h). Η αυθόρμητη δραστηριότητα δεν μειώθηκε σημαντικά (i). (*p < 0,05, μη ζευγαρωμένο t-test). (j,k) Επιδράσεις της έκθεσης σε LTE στα φλοιώδη κατώφλια. Τα μέσα κατώφλια ήταν σημαντικά υψηλότερα σε αρουραίους που εκτέθηκαν σε LTE σε σύγκριση με τους εικονικά εκτεθειμένους αρουραίους. Αυτή η επίδραση είναι πιο έντονη στα χαμηλά και μεσαίες συχνότητες.
Τα Σχήματα 4b-f δείχνουν την κατανομή των παραμέτρων που προέρχονται από το STRF για αυτά τα ζώα (οι μέσοι όροι υποδεικνύονται με κόκκινες γραμμές). Οι επιδράσεις της έκθεσης σε LTE σε ζώα που έλαβαν LPS φάνηκαν να υποδεικνύουν μειωμένη νευρωνική διεγερσιμότητα. Πρώτον, η συνολική ένταση απόκρισης και οι αντιδράσεις ήταν σημαντικά χαμηλότερες στο BF σε σύγκριση με τα ζώα Sham-LPS (Εικ. 4b,c μη ζευγαρωμένο t-test, p = 0,0017 και p = 0,0445). Ομοίως, οι αντιδράσεις στους ήχους επικοινωνίας μειώθηκαν τόσο στην ισχύ απόκρισης όσο και στην αξιοπιστία μεταξύ των δοκιμών (Εικ. 4g,h· μη ζευγαρωμένο t-test, p = 0,043). Η αυθόρμητη δραστηριότητα μειώθηκε, αλλά αυτό το αποτέλεσμα δεν ήταν σημαντικό (Εικ. 4i· p = 0,0745). Η διάρκεια απόκρισης, το εύρος ζώνης συντονισμού και η καθυστέρηση απόκρισης δεν επηρεάστηκαν από την έκθεση σε LTE σε ζώα που έλαβαν LPS (Εικ. 4d-f), υποδεικνύοντας ότι η επιλεκτικότητα συχνότητας και η ακρίβεια των αντιδράσεων έναρξης δεν επηρεάστηκαν από την έκθεση σε LTE σε ζώα που έλαβαν LPS.
Στη συνέχεια αξιολογήσαμε εάν τα καθαρά φλοιώδη κατώφλια τόνου μεταβλήθηκαν από την έκθεση σε LTE. Από την περιοχή απόκρισης συχνότητας (FRA) που ελήφθη από κάθε ηχογράφηση, προσδιορίσαμε τα ακουστικά κατώφλια για κάθε συχνότητα και υπολογίσαμε τον μέσο όρο αυτών των κατωφλίων και για τις δύο ομάδες ζώων. Το Σχήμα 4j δείχνει τα μέσα (± sem) κατώφλια από 1,1 έως 36 kHz σε αρουραίους που έλαβαν LPS. Η σύγκριση των ακουστικών κατωφλίων των ομάδων Sham και Exposed έδειξε μια σημαντική αύξηση στα κατώφλια στα εκτεθειμένα ζώα σε σύγκριση με τα ζώα Sham (Εικ. 4j), ένα φαινόμενο που ήταν πιο έντονο στις χαμηλές και μεσαίες συχνότητες. Πιο συγκεκριμένα, στις χαμηλές συχνότητες (< 2,25 kHz), η αναλογία των νευρώνων A1 με υψηλό κατώφλι αυξήθηκε, ενώ η αναλογία των νευρώνων χαμηλού και μεσαίου κατωφλίου μειώθηκε (chi-square = 43,85; p < 0,0001; Εικ. 4k, αριστερό σχήμα). Το ίδιο αποτέλεσμα παρατηρήθηκε στη μεσαία συχνότητα (2,25 < Freq(kHz) < 11): υψηλότερο ποσοστό φλοιωδών καταγραφών με ενδιάμεσα κατώφλια και μικρότερο ποσοστό νευρώνων με χαμηλά κατώφλια σε σύγκριση με την ομάδα που δεν είχε εκτεθεί (Chi-Square = 71,17; p < 0,001; Σχήμα 4k, μεσαίο πλαίσιο). Υπήρξε επίσης σημαντική διαφορά στο κατώφλι για τους νευρώνες υψηλής συχνότητας (≥ 11 kHz, p = 0,0059). το ποσοστό των νευρώνων χαμηλού κατωφλίου μειώθηκε και το ποσοστό του μεσαίου-υψηλού κατωφλίου αυξήθηκε (chi-square = 10,853; p = 0,04 Σχήμα 4k, δεξιό πλαίσιο).
Το Σχήμα 5α δείχνει τη βέλτιστη κατανομή συχνότητας (BF, προκαλώντας μέγιστη απόκριση στα 75 dB SPL) των φλοιωδών νευρώνων που ελήφθησαν σε υγιή ζώα για τις ομάδες Sham και Exposed. Η στατιστική ανάλυση έδειξε ότι οι δύο κατανομές ήταν παρόμοιες (chi-square, p = 0,157), υποδηλώνοντας ότι οι συγκρίσεις μεταξύ των δύο ομάδων θα μπορούσαν να γίνουν χωρίς μεροληψία δειγματοληψίας.
Επιδράσεις της έκθεσης σε LTE σε ποσοτικοποιημένες παραμέτρους των φλοιωδών αποκρίσεων σε υγιή ζώα. (α) Κατανομή BF σε φλοιώδεις νευρώνες υγιών ζώων που εκτέθηκαν σε LTE (σκούρο μπλε) και εικονικά εκτεθειμένα σε LTE (ανοιχτό μπλε). Δεν υπάρχει διαφορά μεταξύ των δύο κατανομών. (bf) Η επίδραση της έκθεσης σε LTE σε παραμέτρους που ποσοτικοποιούν το φασματικό χρονικό δεκτικό πεδίο (STRF). Δεν υπήρξε σημαντική αλλαγή στην ένταση απόκρισης σε όλο το STRF και στις βέλτιστες συχνότητες (b,c). Υπάρχει μια μικρή αύξηση στη διάρκεια απόκρισης (d), αλλά καμία αλλαγή στο εύρος ζώνης απόκρισης και στο εύρος ζώνης (e, f). Ούτε η ισχύς ούτε η χρονική αξιοπιστία των αποκρίσεων στις φωνητικές εκφωνήσεις άλλαξαν (g, h). Δεν υπήρξε σημαντική αλλαγή στην αυθόρμητη δραστηριότητα (i). (*p < 0,05 μη ζευγαρωμένο t-test). (j,k) Επιδράσεις της έκθεσης σε LTE στα φλοιώδη κατώφλια. Κατά μέσο όρο, τα κατώφλια δεν άλλαξαν σημαντικά σε αρουραίους που εκτέθηκαν σε LTE σε σύγκριση με αρουραίους που εκτέθηκαν εικονικά, αλλά τα υψηλότερα κατώφλια συχνότητας ήταν ελαφρώς χαμηλότερα σε εκτεθειμένα ζώα.
Τα Σχήματα 5b-f δείχνουν γραφήματα κουτιών που αντιπροσωπεύουν την κατανομή και τον μέσο όρο (κόκκινη γραμμή) των παραμέτρων που προέρχονται από τα δύο σύνολα STRF. Σε υγιή ζώα, η ίδια η έκθεση σε LTE είχε μικρή επίδραση στη μέση τιμή των παραμέτρων STRF. Σε σύγκριση με την ομάδα Sham (πλαίσια ανοιχτού έναντι σκούρου μπλε για την ομάδα που εκτέθηκε), η έκθεση σε LTE δεν άλλαξε ούτε τη συνολική ένταση απόκρισης ούτε την απόκριση του BF (Εικ. 5b,c· μη ζευγαρωμένο t-test, p = 0,2176 και p = 0,8696 αντίστοιχα). Δεν υπήρξε επίσης καμία επίδραση στο φασματικό εύρος ζώνης και την καθυστέρηση (p = 0,6764 και p = 0,7129, αντίστοιχα), αλλά υπήρξε σημαντική αύξηση στη διάρκεια απόκρισης (p = 0,047). Δεν υπήρξε επίσης καμία επίδραση στην ισχύ των αποκρίσεων φωνητικής έκφρασης (Εικ. 5g, p = 0,4375), στην αξιοπιστία αυτών των αποκρίσεων μεταξύ των δοκιμών (Εικ. 5h, p = 0,3412) και στην αυθόρμητη δραστηριότητα (Εικ. 5).5i; p = 0,3256).
Το Σχήμα 5j δείχνει τα μέσα (± sem) όρια από 1,1 έως 36 kHz σε υγιείς αρουραίους. Δεν έδειξε σημαντική διαφορά μεταξύ εικονικών και εκτεθειμένων αρουραίων, εκτός από ένα ελαφρώς χαμηλότερο όριο σε εκτεθειμένα ζώα σε υψηλές συχνότητες (11–36 kHz) (μη ζευγαρωμένο t-test, p = 0,0083). Αυτό το φαινόμενο αντανακλά το γεγονός ότι σε εκτεθειμένα ζώα, σε αυτό το εύρος συχνοτήτων (chi-square = 18,312, p = 0,001· Σχήμα 5k), υπήρχαν ελαφρώς περισσότεροι νευρώνες με χαμηλά και μεσαία όρια (ενώ με υψηλά όρια) λιγότεροι νευρώνες).
Συμπερασματικά, όταν υγιή ζώα εκτέθηκαν σε LTE, δεν υπήρξε καμία επίδραση στην ισχύ απόκρισης σε καθαρούς τόνους και σύνθετους ήχους, όπως οι φωνητικές εκφωνήσεις. Επιπλέον, σε υγιή ζώα, τα φλοιώδη ακουστικά κατώφλια ήταν παρόμοια μεταξύ των εκτεθειμένων και των εικονικών ζώων, ενώ σε ζώα που έλαβαν LPS, η έκθεση σε LTE είχε ως αποτέλεσμα σημαντική αύξηση των φλοιωδών κατωφλίων, ειδικά στην περιοχή χαμηλών και μεσαίων συχνοτήτων.
Η μελέτη μας έδειξε ότι σε ενήλικους αρσενικούς αρουραίους που εμφάνισαν οξεία νευροφλεγμονή, η έκθεση σε LTE-1800 MHz με τοπικό SARACx 0,5 W/kg (βλ. Μέθοδοι) είχε ως αποτέλεσμα σημαντική μείωση της έντασης των ηχητικά προκληθεισών αποκρίσεων στις πρωτογενείς καταγραφές επικοινωνίας. Αυτές οι αλλαγές στη νευρωνική δραστηριότητα εμφανίστηκαν χωρίς καμία εμφανή αλλαγή στην έκταση του χωρικού τομέα που καλύπτεται από τις μικρογλοιακές διεργασίες. Αυτή η επίδραση του LTE στην ένταση των φλοιωδών προκληθεισών αποκρίσεων δεν παρατηρήθηκε σε υγιείς αρουραίους. Λαμβάνοντας υπόψη την ομοιότητα στη βέλτιστη κατανομή συχνότητας μεταξύ των μονάδων καταγραφής σε ζώα που εκτέθηκαν σε LTE και σε ζώα που εκτέθηκαν ψευδώς, οι διαφορές στη νευρωνική αντιδραστικότητα μπορούν να αποδοθούν σε βιολογικές επιδράσεις των σημάτων LTE παρά σε μεροληψία δειγματοληψίας (Εικ. 4α). Επιπλέον, η απουσία αλλαγών στην καθυστέρηση απόκρισης και στο εύρος ζώνης φασματικού συντονισμού σε αρουραίους που εκτέθηκαν σε LTE υποδηλώνει ότι, πιθανότατα, αυτές οι καταγραφές ελήφθησαν από τα ίδια φλοιώδη στρώματα, τα οποία βρίσκονται στις πρωτογενείς ACx και όχι στις δευτερογενείς περιοχές.
Από όσο γνωρίζουμε, η επίδραση της σηματοδότησης LTE στις νευρωνικές αποκρίσεις δεν έχει αναφερθεί προηγουμένως. Ωστόσο, προηγούμενες μελέτες έχουν τεκμηριώσει την ικανότητα του συνεχούς κύματος (CW) GSM-1800 MHz ή 1800 MHz να μεταβάλλει τη νευρωνική διεγερσιμότητα, αν και με σημαντικές διαφορές ανάλογα με την πειραματική προσέγγιση. Λίγο μετά την έκθεση σε 1800 MHz CW σε επίπεδο SAR 8,2 W/Kg, οι καταγραφές από τα γάγγλια σαλιγκαριού έδειξαν μειωμένα κατώφλια για την ενεργοποίηση δυναμικών δράσης και νευρωνικής διαμόρφωσης. Από την άλλη πλευρά, η δραστηριότητα αιχμής και έκρηξης σε πρωτογενείς νευρωνικές καλλιέργειες που προέρχονται από εγκέφαλο αρουραίου μειώθηκε με έκθεση σε GSM-1800 MHz ή 1800 MHz CW για 15 λεπτά σε SAR 4,6 W/kg. Αυτή η αναστολή ήταν μόνο εν μέρει αναστρέψιμη εντός 30 λεπτών από την έκθεση. Η πλήρης σίγηση των νευρώνων επιτεύχθηκε σε SAR 9,2 W/kg. Η ανάλυση δόσης-απόκρισης έδειξε ότι το GSM-1800 MHz ήταν πιο αποτελεσματικό από το 1800. MHz CW στην καταστολή της δραστηριότητας ριπών, υποδηλώνοντας ότι οι νευρωνικές αποκρίσεις εξαρτώνται από τη διαμόρφωση σήματος RF.
Στο δικό μας περιβάλλον, οι φλοιώδεις προκληθείσες αποκρίσεις συλλέχθηκαν in vivo 3 έως 6 ώρες μετά το τέλος της 2ωρης έκθεσης μόνο στο κεφάλι. Σε μια προηγούμενη μελέτη, ερευνήσαμε την επίδραση του GSM-1800 MHz σε SARACx 1,55 W/kg και δεν βρήκαμε σημαντική επίδραση στις φλοιώδεις αποκρίσεις που προκαλούνται από τον ήχο σε υγιείς αρουραίους. Εδώ, η μόνη σημαντική επίδραση που προκλήθηκε σε υγιείς αρουραίους από την έκθεση σε LTE-1800 στα 0,5 W/kg SARACx ήταν μια μικρή αύξηση στη διάρκεια της απόκρισης κατά την παρουσίαση καθαρών τόνων. Αυτό το φαινόμενο είναι δύσκολο να εξηγηθεί επειδή δεν συνοδεύεται από αύξηση στην ένταση της απόκρισης, υποδηλώνοντας ότι αυτή η μεγαλύτερη διάρκεια απόκρισης συμβαίνει με τον ίδιο συνολικό αριθμό δυναμικών δράσης που ενεργοποιούνται από τους φλοιώδεις νευρώνες. Μια εξήγηση θα μπορούσε να είναι ότι η έκθεση σε LTE μπορεί να μειώσει τη δραστηριότητα ορισμένων ανασταλτικών ενδιάμεσων νευρώνων, καθώς έχει τεκμηριωθεί ότι στην πρωτογενή ACx η αναστολή προς τα εμπρός ελέγχει τη διάρκεια των πυραμιδικών κυτταρικών αποκρίσεων που ενεργοποιούνται από διεγερτική θαλαμική είσοδο33,34, 35, 36, 37.
Αντίθετα, σε αρουραίους που υποβλήθηκαν σε νευροφλεγμονή που προκαλείται από LPS, η έκθεση σε LTE δεν είχε καμία επίδραση στη διάρκεια της νευρωνικής πυροδότησης που προκαλείται από τον ήχο, αλλά ανιχνεύθηκαν σημαντικές επιδράσεις στην ισχύ των προκληθέντων αποκρίσεων. Στην πραγματικότητα, σε σύγκριση με τις νευρωνικές αποκρίσεις που καταγράφηκαν σε αρουραίους που εκτέθηκαν ψευδώς σε LPS, οι νευρώνες σε αρουραίους που έλαβαν θεραπεία με LPS και εκτέθηκαν σε LTE παρουσίασαν μείωση στην ένταση των αποκρίσεών τους, ένα φαινόμενο που παρατηρήθηκε τόσο κατά την παρουσίαση καθαρών τόνων όσο και φυσικών φωνητικών εκδηλώσεων. Η μείωση της έντασης της απόκρισης σε καθαρούς τόνους συνέβη χωρίς μείωση του φασματικού εύρους ζώνης συντονισμού κατά 75 dB, και δεδομένου ότι συνέβη σε όλες τις εντάσεις ήχου, είχε ως αποτέλεσμα την αύξηση των ακουστικών κατωφλίων των φλοιωδών νευρώνων σε χαμηλές και μεσαίες συχνότητες.
Η μείωση της έντασης της προκλητής απόκρισης έδειξε ότι η επίδραση της σηματοδότησης LTE σε SARACx 0,5 W/kg σε ζώα που έλαβαν LPS ήταν παρόμοια με αυτή του GSM-1800 MHz που εφαρμόστηκε σε τρεις φορές υψηλότερο SARACx (1,55 W/kg) 28. Όσον αφορά τη σηματοδότηση GSM, η έκθεση της κεφαλής σε LTE-1800 MHz μπορεί να μειώσει τη νευρωνική διεγερσιμότητα σε νευρώνες ACx αρουραίου που υποβάλλονται σε νευροφλεγμονή που προκαλείται από LPS. Σύμφωνα με αυτήν την υπόθεση, παρατηρήσαμε επίσης μια τάση προς μειωμένη αξιοπιστία των νευρωνικών αποκρίσεων στην φώνηση (Εικ. 4h) και μειωμένη αυθόρμητη δραστηριότητα (Εικ. 4i). Ωστόσο, ήταν δύσκολο να προσδιοριστεί in vivo εάν η σηματοδότηση LTE μειώνει την εγγενή νευρωνική διεγερσιμότητα ή μειώνει τη συναπτική είσοδο, ελέγχοντας έτσι τις νευρωνικές αποκρίσεις στο ACx.
Καταρχάς, αυτές οι ασθενέστερες αποκρίσεις μπορεί να οφείλονται στην εγγενώς μειωμένη διεγερσιμότητα των φλοιωδών κυττάρων μετά την έκθεση σε LTE 1800 MHz. Υποστηρίζοντας αυτή την ιδέα, τα GSM-1800 MHz και 1800 MHz-CW μείωσαν τη δραστηριότητα έκρηξης όταν εφαρμόστηκαν απευθείας σε πρωτογενείς καλλιέργειες νευρώνων του φλοιού αρουραίου με επίπεδα SAR 3,2 W/kg και 4,6 W/kg, αντίστοιχα, αλλά απαιτήθηκε ένα επίπεδο κατωφλίου SAR για τη σημαντική μείωση της δραστηριότητας έκρηξης. Υποστηρίζοντας τη μειωμένη εγγενή διεγερσιμότητα, παρατηρήσαμε επίσης χαμηλότερα ποσοστά αυθόρμητης πυροδότησης σε εκτεθειμένα ζώα από ό,τι σε εικονικά εκτεθειμένα ζώα.
Δεύτερον, η έκθεση σε LTE μπορεί επίσης να επηρεάσει τη συναπτική μετάδοση από τις θαλαμο-φλοιώδεις ή φλοιο-φλοιώδεις συνάψεις. Πολυάριθμα αρχεία δείχνουν τώρα ότι, στον ακουστικό φλοιό, το εύρος του φασματικού συντονισμού δεν καθορίζεται αποκλειστικά από τις προσαγωγές θαλαμικές προβολές, αλλά ότι οι ενδοφλοιώδεις συνδέσεις παρέχουν πρόσθετη φασματική είσοδο σε φλοιώδεις θέσεις39,40. Στα πειράματά μας, το γεγονός ότι το φλοιώδες STRF έδειξε παρόμοιο εύρος ζώνης σε εκτεθειμένα και εικονικά εκτεθειμένα ζώα υποδηλώνει έμμεσα ότι οι επιδράσεις της έκθεσης σε LTE δεν ήταν επιδράσεις στη φλοιο-φλοιώδη συνδεσιμότητα. Αυτό υποδηλώνει επίσης ότι η υψηλότερη συνδεσιμότητα σε άλλες φλοιώδεις περιοχές που εκτίθενται σε SAR από ό,τι μετρήθηκε στο ACx (Εικ. 2) μπορεί να μην είναι υπεύθυνη για τις αλλοιωμένες αποκρίσεις που αναφέρονται εδώ.
Εδώ, ένα μεγαλύτερο ποσοστό φλοιωδών καταγραφών που εκτέθηκαν σε LPS έδειξε υψηλά κατώφλια σε σύγκριση με ζώα που εκτέθηκαν εικονικά σε LPS. Δεδομένου ότι έχει προταθεί ότι το φλοιώδες ακουστικό κατώφλι ελέγχεται κυρίως από την ισχύ της θαλαμο-φλοιώδους σύναψης39,40, μπορεί να υποψιαστεί κανείς ότι η θαλαμο-φλοιώδης μετάδοση μειώνεται εν μέρει από την έκθεση, είτε προσυναπτικά (μειωμένη απελευθέρωση γλουταμινικού) είτε μετασυναπτικά (μειωμένος αριθμός υποδοχέων ή συγγένεια).
Παρόμοια με τις επιδράσεις του GSM-1800 MHz, οι επαγόμενες από LTE αλλοιωμένες νευρωνικές αποκρίσεις εμφανίστηκαν στο πλαίσιο νευροφλεγμονής που προκαλείται από LPS, η οποία χαρακτηρίζεται από μικρογλοιακές αποκρίσεις. Τα τρέχοντα στοιχεία υποδηλώνουν ότι η μικρογλοία επηρεάζει έντονα τη δραστηριότητα των νευρωνικών δικτύων σε φυσιολογικούς και παθολογικούς εγκεφάλους41,42,43. Η ικανότητά τους να τροποποιούν τη νευροδιαβίβαση εξαρτάται όχι μόνο από την παραγωγή ενώσεων που παράγουν που μπορεί ή μπορεί να περιορίσουν τη νευροδιαβίβαση, αλλά και από την υψηλή κινητικότητα των κυτταρικών τους διεργασιών. Στον εγκεφαλικό φλοιό, τόσο η αυξημένη όσο και η μειωμένη δραστηριότητα των νευρωνικών δικτύων πυροδοτούν ταχεία επέκταση του μικρογλοιακού χωρικού τομέα λόγω της ανάπτυξης των μικρογλοιακών διεργασιών44,45. Συγκεκριμένα, οι μικρογλοιακές προεξοχές προσλαμβάνονται κοντά σε ενεργοποιημένες θαλαμοφλοιώδεις συνάψεις και μπορούν να αναστείλουν τη δραστηριότητα των διεγερτικών συνάψεων μέσω μηχανισμών που περιλαμβάνουν τοπική παραγωγή αδενοσίνης που προκαλείται από μικρογλοία.
Σε αρουραίους που υποβλήθηκαν σε αγωγή με LPS και υποβλήθηκαν σε GSM-1800 MHz με SARACx στα 1,55 W/kg, παρατηρήθηκε μειωμένη δραστηριότητα των νευρώνων ACx με την ανάπτυξη μικρογλοιακών αποφύσεων που σηματοδοτήθηκε από σημαντικές περιοχές χρωματισμένες με Iba1 στην αύξηση του ACx28. Αυτή η παρατήρηση υποδηλώνει ότι η αναδιαμόρφωση της μικρογλοίας που προκαλείται από την έκθεση στο GSM μπορεί να συμβάλει ενεργά στη μείωση των νευρωνικών αποκρίσεων που προκαλούνται από τον ήχο από το GSM. Η τρέχουσα μελέτη μας αντιτίθεται σε αυτήν την υπόθεση στο πλαίσιο της έκθεσης στο κεφάλι LTE με SARACx περιορισμένο στα 0,5 W/kg, καθώς δεν διαπιστώσαμε αύξηση στον χωρικό τομέα που καλύπτεται από μικρογλοιακές αποφύσεις. Ωστόσο, αυτό δεν αποκλείει καμία επίδραση της σηματοδότησης LTE στην μικρογλοία που ενεργοποιείται από LPS, η οποία με τη σειρά της μπορεί να επηρεάσει τη νευρωνική δραστηριότητα. Απαιτούνται περαιτέρω μελέτες για να απαντηθεί αυτό το ερώτημα και να προσδιοριστούν οι μηχανισμοί με τους οποίους η οξεία νευροφλεγμονή μεταβάλλει τις νευρωνικές αποκρίσεις στη σηματοδότηση LTE.
Από όσο γνωρίζουμε, η επίδραση των σημάτων LTE στην ακουστική επεξεργασία δεν έχει μελετηθεί στο παρελθόν. Οι προηγούμενες μελέτες μας 26,28 και η τρέχουσα μελέτη έδειξαν ότι σε περιπτώσεις οξείας φλεγμονής, η έκθεση μόνο του κεφαλιού σε GSM-1800 MHz ή LTE-1800 MHz οδήγησε σε λειτουργικές αλλοιώσεις στις νευρωνικές αποκρίσεις στο ACx, όπως φαίνεται από την αύξηση του κατωφλίου ακοής. Για τουλάχιστον δύο κύριους λόγους, η κοχλιακή λειτουργία δεν θα πρέπει να επηρεάζεται από την έκθεσή μας στο LTE. Πρώτον, όπως φαίνεται στη μελέτη δοσιμετρίας που φαίνεται στο Σχήμα 2, τα υψηλότερα επίπεδα SAR (κοντά στο 1 W/kg) βρίσκονται στον ραχιαίο-μεσαίο φλοιό (κάτω από την κεραία) και μειώνονται σημαντικά καθώς κάποιος κινείται πιο πλευρικά και πλάγια. Το κοιλιακό μέρος του κεφαλιού. Μπορεί να εκτιμηθεί ότι είναι περίπου 0,1 W/kg στο επίπεδο του πτερυγίου του αρουραίου (κάτω από τον ακουστικό πόρο). Δεύτερον, όταν τα αυτιά των ινδικών χοιριδίων εκτέθηκαν για 2 μήνες σε GSM 900 MHz (5 ημέρες/εβδομάδα, 1 ώρα/ημέρα, SAR μεταξύ 1 και 4 W/kg), δεν υπήρχαν ανιχνεύσιμες αλλαγές στο μέγεθος του προϊόντος παραμόρφωσης ωτοακουστικά όρια για εκπομπές και ακουστικές αντιδράσεις του εγκεφαλικού στελέχους 47. Επιπλέον, η επαναλαμβανόμενη έκθεση της κεφαλής σε GSM 900 ή 1800 MHz σε τοπικό SAR 2 W/kg δεν επηρέασε τη λειτουργία των κοχλιακών εξωτερικών τριχωτών κυττάρων σε υγιείς αρουραίους48,49. Αυτά τα αποτελέσματα αντικατοπτρίζουν δεδομένα που ελήφθησαν σε ανθρώπους, όπου έρευνες έχουν δείξει ότι η έκθεση 10 έως 30 λεπτών σε ηλεκτρομαγνητικά πεδία από κινητά τηλέφωνα GSM δεν έχει συνεπή επίδραση στην ακουστική επεξεργασία, όπως αξιολογήθηκε σε επίπεδο κοχλία50,51,52​ή εγκεφαλικού στελέχους53,54.
Στη μελέτη μας, αλλαγές στην πυροδότηση νευρώνων που ενεργοποιούνται από το LTE παρατηρήθηκαν in vivo 3 έως 6 ώρες μετά το τέλος της έκθεσης. Σε μια προηγούμενη μελέτη στο ραχιαίο-μεσαίο τμήμα του φλοιού, αρκετές επιδράσεις που προκαλούνται από το GSM-1800 MHz και παρατηρούνται 24 ώρες μετά την έκθεση δεν είναι πλέον ανιχνεύσιμες 72 ώρες μετά την έκθεση. Αυτό συμβαίνει με την επέκταση των μικρογλοιακών αποφύσεων, την υπορρύθμιση του γονιδίου IL-1β και την μετα-μεταφραστική τροποποίηση των υποδοχέων AMPA. Λαμβάνοντας υπόψη ότι ο ακουστικός φλοιός έχει χαμηλότερη τιμή SAR (0,5W/kg) από την ραχιαίο-μεσαία περιοχή (2,94W/kg26), οι αλλαγές στη νευρωνική δραστηριότητα που αναφέρονται εδώ φαίνεται να είναι παροδικές.
Τα δεδομένα μας θα πρέπει να λαμβάνουν υπόψη τα όρια SAR που ισχύουν και τις εκτιμήσεις των πραγματικών τιμών SAR που επιτυγχάνονται στον εγκεφαλικό φλοιό των χρηστών κινητών τηλεφώνων. Τα ισχύοντα πρότυπα που χρησιμοποιούνται για την προστασία του κοινού ορίζουν το όριο SAR στα 2 W/kg για την τοπική έκθεση του κεφαλιού ή του κορμού σε ραδιοσυχνότητες στην περιοχή RF των 100 kHz και 6 GHz.
Έχουν πραγματοποιηθεί προσομοιώσεις δόσης χρησιμοποιώντας διαφορετικά μοντέλα ανθρώπινης κεφαλής για τον προσδιορισμό της απορρόφησης ισχύος RF σε διαφορετικούς ιστούς της κεφαλής κατά τη διάρκεια γενικής επικοινωνίας με το κεφάλι ή το κινητό τηλέφωνο. Εκτός από την ποικιλομορφία των μοντέλων ανθρώπινης κεφαλής, αυτές οι προσομοιώσεις υπογραμμίζουν σημαντικές διαφορές ή αβεβαιότητες στην εκτίμηση της ενέργειας που απορροφάται από τον εγκέφαλο με βάση ανατομικές ή ιστολογικές παραμέτρους όπως το εξωτερικό ή εσωτερικό σχήμα του κρανίου, το πάχος ή η περιεκτικότητα σε νερό. Οι διαφορετικοί ιστοί της κεφαλής ποικίλλουν σημαντικά ανάλογα με την ηλικία, το φύλο ή το άτομο 56,57,58. Επιπλέον, τα χαρακτηριστικά των κινητών τηλεφώνων, όπως η εσωτερική θέση της κεραίας και η θέση του κινητού τηλεφώνου σε σχέση με το κεφάλι του χρήστη, επηρεάζουν έντονα το επίπεδο και την κατανομή των τιμών SAR στον εγκεφαλικό φλοιό 59,60. Ωστόσο, λαμβάνοντας υπόψη τις αναφερόμενες κατανομές SAR στον ανθρώπινο εγκεφαλικό φλοιό, οι οποίες καθορίστηκαν από μοντέλα κινητών τηλεφώνων που εκπέμπουν ραδιοσυχνότητες στην περιοχή των 1800 MHz 58, 59, 60, φαίνεται ότι τα επίπεδα SAR που επιτυγχάνονται στον ανθρώπινο ακουστικό φλοιό εξακολουθούν να υποεφαρμόζονται στο μισό του ανθρώπινου εγκεφαλικού φλοιού. Η μελέτη μας (SARACx 0.5 W/kg). Συνεπώς, τα δεδομένα μας δεν αμφισβητούν τα τρέχοντα όρια τιμών SAR που ισχύουν για το κοινό.
Συμπερασματικά, η μελέτη μας δείχνει ότι μια μόνο έκθεση στο LTE-1800 MHz μόνο στο κεφάλι επηρεάζει τις νευρωνικές αποκρίσεις των φλοιωδών νευρώνων σε αισθητηριακά ερεθίσματα. Σε συμφωνία με προηγούμενους χαρακτηρισμούς των επιδράσεων της σηματοδότησης GSM, τα αποτελέσματά μας υποδηλώνουν ότι οι επιδράσεις της σηματοδότησης LTE στη νευρωνική δραστηριότητα ποικίλλουν ανάλογα με την κατάσταση της υγείας. Η οξεία νευροφλεγμονή ευαισθητοποιεί τους νευρώνες στο LTE-1800 MHz, με αποτέλεσμα την αλλοιωμένη επεξεργασία των ακουστικών ερεθισμάτων από τον φλοιό.
Τα δεδομένα συλλέχθηκαν σε ηλικία 55 ημερών από τον εγκεφαλικό φλοιό 31 ενήλικων αρσενικών αρουραίων Wistar που ελήφθησαν στο εργαστήριο Janvier. Οι αρουραίοι στεγάστηκαν σε εγκατάσταση ελεγχόμενης υγρασίας (50-55%) και θερμοκρασίας (22-24 °C) με κύκλο φωτός/σκότους 12 ωρών/12 ωρών (φώτα αναμμένα στις 7:30 π.μ.) με ελεύθερη πρόσβαση σε τροφή και νερό. Όλα τα πειράματα πραγματοποιήθηκαν σύμφωνα με τις κατευθυντήριες γραμμές που θεσπίστηκαν από την Οδηγία του Συμβουλίου των Ευρωπαϊκών Κοινοτήτων (Οδηγία του Συμβουλίου 2010/63/ΕΕ), οι οποίες είναι παρόμοιες με εκείνες που περιγράφονται στις Κατευθυντήριες Γραμμές της Εταιρείας Νευροεπιστημών για τη Χρήση Ζώων στην Έρευνα των Νευροεπιστημών. Το παρόν πρωτόκολλο εγκρίθηκε από την Επιτροπή Δεοντολογίας Paris-Sud and Center (CEEA N°59, Έργο 2014-25, Εθνικό Πρωτόκολλο 03729.02) χρησιμοποιώντας διαδικασίες που έχουν επικυρωθεί από την εν λόγω επιτροπή 32-2011 και 34-2012.
Τα ζώα εξοικειώθηκαν με τους θαλάμους αποικιών για τουλάχιστον 1 εβδομάδα πριν από την επεξεργασία με LPS και την έκθεση (ή την εικονική έκθεση) σε LTE-EMF.
Είκοσι δύο αρουραίοι έλαβαν ενδοπεριτοναϊκή ένεση (ip) με LPS E. coli (250 µg/kg, ορότυπος 0127:B8, SIGMA) αραιωμένο με αποστειρωμένο ισότονο αλατούχο διάλυμα χωρίς ενδοτοξίνη 24 ώρες πριν από την LTE ή την εικονική έκθεση (n ανά ομάδα). = 11). Σε αρσενικούς αρουραίους Wistar ηλικίας 2 μηνών, αυτή η θεραπεία με LPS προκαλεί μια νευροφλεγμονώδη απόκριση που σηματοδοτείται στον εγκεφαλικό φλοιό από διάφορα προφλεγμονώδη γονίδια (παράγοντας νέκρωσης όγκων-άλφα, ιντερλευκίνη 1β, CCL2, NOX2, NOS2) τα οποία αυξήθηκαν 24 ώρες μετά την ένεση LPS, συμπεριλαμβανομένης μιας 4πλάσιας και 12πλάσιας αύξησης στα επίπεδα των μεταγράφων που κωδικοποιούν το ένζυμο NOX2 και την ιντερλευκίνη 1β, αντίστοιχα. Σε αυτό το χρονικό σημείο 24 ωρών, η μικρογλοία του φλοιού εμφάνισε την τυπική «πυκνή» κυτταρική μορφολογία που αναμένεται από την προφλεγμονώδη ενεργοποίηση των κυττάρων που προκαλείται από LPS (Σχήμα 1), η οποία έρχεται σε αντίθεση με την ενεργοποίηση που προκαλείται από LPS από άλλους. Η κυτταρική προφλεγμονώδης ενεργοποίηση αντιστοιχεί σε 24, 61.
Η έκθεση μόνο του κεφαλιού σε LTE EMF πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας την πειραματική διάταξη που χρησιμοποιήθηκε προηγουμένως για την αξιολόγηση της επίδρασης του GSM EMF26. Η έκθεση σε LTE πραγματοποιήθηκε 24 ώρες μετά την ένεση LPS (11 ζώα) ή χωρίς θεραπεία με LPS (5 ζώα). Τα ζώα αναισθητοποιήθηκαν ελαφρά με κεταμίνη/ξυλαζίνη (κεταμίνη 80 mg/kg, ip· ξυλαζίνη 10 mg/kg, ip) πριν από την έκθεση για να αποφευχθεί η κίνηση και να διασφαλιστεί ότι το κεφάλι του ζώου βρισκόταν στην κεραία βρόχου που εκπέμπει το σήμα LTE. Αναπαραγώγιμη θέση παρακάτω. Οι μισοί από τους αρουραίους από το ίδιο κλουβί χρησίμευσαν ως μάρτυρες (11 εικονικά εκτεθειμένα ζώα, από τους 22 αρουραίους που είχαν προθεραπευτεί με LPS): τοποθετήθηκαν κάτω από την κεραία βρόχου και η ενέργεια του σήματος LTE ορίστηκε στο μηδέν. Τα βάρη των εκτεθειμένων και των εικονικά εκτεθειμένων ζώων ήταν παρόμοια (p = 0,558, μη ζευγαρωμένο t-test, ns). Όλα τα αναισθητοποιημένα ζώα τοποθετήθηκαν σε ένα θερμαντικό υπόθεμα χωρίς μέταλλο για να διατηρηθεί η θερμοκρασία του σώματός τους περίπου στους 37°C καθ' όλη τη διάρκεια. πείραμα. Όπως και στα προηγούμενα πειράματα, ο χρόνος έκθεσης ορίστηκε σε 2 ώρες. Μετά την έκθεση, τοποθετήστε το ζώο σε ένα άλλο θερμαντικό υπόθεμα στο χειρουργείο. Η ίδια διαδικασία έκθεσης εφαρμόστηκε σε 10 υγιείς αρουραίους (χωρίς θεραπεία με LPS), οι μισοί από τους οποίους εκτέθηκαν εικονικά από το ίδιο κλουβί (p = 0,694).
Το σύστημα έκθεσης ήταν παρόμοιο με τα συστήματα 25, 62 που περιγράφηκαν σε προηγούμενες μελέτες, με την γεννήτρια ραδιοσυχνοτήτων να έχει αντικατασταθεί για να παράγει ηλεκτρομαγνητικά πεδία LTE αντί για GSM. Εν συντομία, μια γεννήτρια RF (SMBV100A, 3,2 GHz, Rohde & Schwarz, Γερμανία) που εκπέμπει ηλεκτρομαγνητικό πεδίο LTE - 1800 MHz συνδέθηκε σε έναν ενισχυτή ισχύος (ZHL-4W-422+, Mini-Circuits, ΗΠΑ), έναν κυκλοφορητή (D3 1719-N, Sodhy, Γαλλία), έναν αμφίδρομο ζεύκτη (CD D 1824-2, − 30 dB, Sodhy, Γαλλία) και έναν τετραπλό διαιρέτη ισχύος (DC D 0922-4N, Sodhy, Γαλλία), επιτρέποντας την ταυτόχρονη έκθεση τεσσάρων ζώων. Ένας μετρητής ισχύος (N1921A, Agilent, ΗΠΑ) συνδεδεμένος σε έναν αμφίδρομο ζεύκτη επέτρεψε τη συνεχή μέτρηση και παρακολούθηση της προσπίπτουσας και ανακλώμενης ισχύος εντός της συσκευής. Κάθε έξοδος συνδέθηκε σε μια κεραία βρόχου (Sama-Sistemi srl; Roma), επιτρέποντας μερική έκθεση του κεφαλιού του ζώου. Η κεραία βρόχου αποτελείται από ένα τυπωμένο κύκλωμα με δύο μεταλλικές γραμμές (διηλεκτρική σταθερά εr = 4,6) χαραγμένες σε ένα μονωτικό εποξειδικό υπόστρωμα. Στο ένα άκρο, η συσκευή αποτελείται από ένα σύρμα πλάτους 1 mm που σχηματίζει έναν δακτύλιο τοποθετημένο κοντά στο κεφάλι του ζώου. Όπως και σε προηγούμενες μελέτες26,62, ο ειδικός ρυθμός απορρόφησης (SAR) προσδιορίστηκε αριθμητικά χρησιμοποιώντας ένα αριθμητικό μοντέλο αρουραίου και μια μέθοδο πεπερασμένης διαφοράς χρόνου (FDTD)63,64,65. Προσδιορίστηκαν επίσης πειραματικά σε ένα ομοιογενές μοντέλο αρουραίου χρησιμοποιώντας αισθητήρες Luxtron για τη μέτρηση της αύξησης της θερμοκρασίας. Σε αυτήν την περίπτωση, ο SAR σε W/kg υπολογίζεται χρησιμοποιώντας τον τύπο: SAR = C ΔT/Δt, όπου C είναι η θερμοχωρητικότητα σε J/(kg K), ΔT, σε °K και Δt Αλλαγή θερμοκρασίας, χρόνος σε δευτερόλεπτα. Οι αριθμητικά προσδιορισμένες τιμές SAR συγκρίθηκαν με πειραματικές τιμές SAR που ελήφθησαν χρησιμοποιώντας ένα ομοιογενές μοντέλο, ειδικά σε ισοδύναμες περιοχές εγκεφάλου αρουραίου. Η διαφορά μεταξύ των αριθμητικών μετρήσεων SAR και των πειραματικά ανιχνευμένων Οι τιμές SAR είναι μικρότερες από 30%.
Το Σχήμα 2α δείχνει την κατανομή SAR στον εγκέφαλο αρουραίου στο μοντέλο αρουραίου, η οποία ταιριάζει με την κατανομή ως προς το σωματικό βάρος και το μέγεθος των αρουραίων που χρησιμοποιήθηκαν στη μελέτη μας. Ο μέσος όρος SAR του εγκεφάλου ήταν 0,37 ± 0,23 W/kg (μέσος όρος ± SD). Οι τιμές SAR είναι υψηλότερες στην περιοχή του φλοιού ακριβώς κάτω από την κεραία βρόχου. Ο τοπικός SAR στο ACx (SARACx) ήταν 0,50 ± 0,08 W/kg (μέσος όρος ± SD) (Εικ. 2b). Δεδομένου ότι τα σωματικά βάρη των εκτεθειμένων αρουραίων είναι ομοιογενή και οι διαφορές στο πάχος του ιστού της κεφαλής είναι αμελητέες, ο πραγματικός SAR του ACx ή άλλων περιοχών του φλοιού αναμένεται να είναι πολύ παρόμοιος μεταξύ των δύο εκτεθειμένων ζώων.
Στο τέλος της έκθεσης, τα ζώα έλαβαν συμπληρωματικά επιπρόσθετες δόσεις κεταμίνης (20 mg/kg, ip) και ξυλαζίνης (4 mg/kg, ip) μέχρι να μην παρατηρηθούν αντανακλαστικές κινήσεις μετά το τσίμπημα του πίσω ποδιού. Ένα τοπικό αναισθητικό (Ξυλοκαΐνη 2%) εγχύθηκε υποδορίως στο δέρμα και στον κροταφικό μυ πάνω από το κρανίο και τα ζώα τοποθετήθηκαν σε σύστημα θέρμανσης χωρίς μέταλλο. Μετά την τοποθέτηση του ζώου στο στερεοταξικό πλαίσιο, πραγματοποιήθηκε κρανιοτομή πάνω από τον αριστερό κροταφικό φλοιό. Όπως και στην προηγούμενη μελέτη μας66, ξεκινώντας από τη συμβολή του βρεγματικού και του κροταφικού οστού, το άνοιγμα είχε πλάτος 9 mm και ύψος 5 mm. Η σκληρά μήνιγγα πάνω από το ACx αφαιρέθηκε προσεκτικά υπό διόφθαλμο έλεγχο χωρίς να καταστραφούν τα αιμοφόρα αγγεία. Στο τέλος της διαδικασίας, κατασκευάστηκε μια βάση σε οδοντιατρικό ακρυλικό τσιμέντο για ατραυματική στερέωση της κεφαλής του ζώου κατά την καταγραφή. Τοποθετήστε το στερεοταξικό πλαίσιο που στηρίζει το ζώο σε έναν θάλαμο ακουστικής εξασθένησης (IAC, μοντέλο AC1).
Τα δεδομένα ελήφθησαν από καταγραφές πολλαπλών μονάδων στον πρωτεύοντα ακουστικό φλοιό 20 αρουραίων, συμπεριλαμβανομένων 10 ζώων που είχαν υποβληθεί σε προεπεξεργασία με LPS. Οι εξωκυτταρικές καταγραφές ελήφθησαν από μια συστοιχία 16 ηλεκτροδίων βολφραμίου (TDT, ø: 33 µm, < 1 MΩ) που αποτελούνταν από δύο σειρές 8 ηλεκτροδίων σε απόσταση 1000 µm μεταξύ τους (350 µm μεταξύ των ηλεκτροδίων στην ίδια σειρά). Ένα ασημένιο σύρμα (ø: 300 µm) για γείωση εισήχθη μεταξύ του κροταφικού οστού και της αντίπλευρης σκληράς μήνιγγας. Η εκτιμώμενη θέση του πρωτεύοντος ACx είναι 4-7 mm πίσω από το βρέγμα και 3 mm κοιλιακά από την υπερκροταφική ραφή. Το ακατέργαστο σήμα ενισχύθηκε 10.000 φορές (TDT Medusa) και στη συνέχεια υποβλήθηκε σε επεξεργασία από ένα σύστημα συλλογής δεδομένων πολλαπλών καναλιών (RX5, TDT). Τα σήματα που συλλέχθηκαν από κάθε ηλεκτρόδιο φιλτραρίστηκαν (610–10.000 Hz) για την εξαγωγή δραστηριότητας πολλαπλών μονάδων (MUA). Τα επίπεδα ενεργοποίησης ορίστηκαν προσεκτικά για κάθε ηλεκτρόδιο (από συν-συγγραφείς (τυφλωμένοι σε εκτεθειμένες ή ψευδώς εκτεθειμένες καταστάσεις) για να επιλέξουν το μεγαλύτερο δυναμικό δράσης από το σήμα. Η επιθεώρηση των κυματομορφών online και offline έδειξε ότι η MUA που συλλέχθηκε εδώ αποτελούνταν από δυναμικά δράσης που δημιουργήθηκαν από 3 έως 6 νευρώνες κοντά στα ηλεκτρόδια. Στην αρχή κάθε πειράματος, ορίσαμε τη θέση της διάταξης ηλεκτροδίων έτσι ώστε δύο σειρές οκτώ ηλεκτροδίων να μπορούν να δειγματοληπτήσουν νευρώνες, από αποκρίσεις χαμηλής έως υψηλής συχνότητας όταν εκτελούνται σε ρυγχοειδή προσανατολισμό.
Ακουστικά ερεθίσματα δημιουργήθηκαν στο Matlab, μεταδόθηκαν σε ένα σύστημα παροχής ήχου (TDT) βασισμένο στο RP2.1 και στάλθηκαν σε ένα μεγάφωνο Fostex (FE87E). Το μεγάφωνο τοποθετήθηκε 2 cm από το δεξί αυτί του αρουραίου, στην οποία απόσταση το μεγάφωνο παρήγαγε ένα επίπεδο φάσμα συχνότητας (± 3 dB) μεταξύ 140 Hz και 36 kHz. Η βαθμονόμηση του μεγαφώνου πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας θόρυβο και καθαρούς τόνους που καταγράφηκαν με ένα μικρόφωνο Bruel και Kjaer 4133 συνδεδεμένο με έναν προενισχυτή B&K 2169 και μια ψηφιακή συσκευή εγγραφής Marantz PMD671. Το Φασματικό Χρονικό Δεκτικό Πεδίο (STRF) προσδιορίστηκε χρησιμοποιώντας 97 συχνότητες γάμμα-τόνου, που καλύπτουν 8 (0,14–36 kHz) οκτάβες, που παρουσιάζονται σε τυχαία σειρά στα 75 dB SPL στα 4,15 Hz. Η Περιοχή Απόκρισης Συχνότητας (FRA) προσδιορίζεται χρησιμοποιώντας το ίδιο σύνολο τόνων και παρουσιάζεται σε τυχαία σειρά στα 2 Hz από 75 έως 5 dB SPL. Κάθε συχνότητα παρουσιάζεται οκτώ φορές σε κάθε ένταση.
Αξιολογήθηκαν επίσης οι αντιδράσεις σε φυσικά ερεθίσματα. Σε προηγούμενες μελέτες, παρατηρήσαμε ότι οι φωνητικές εκφωνήσεις σε αρουραίους σπάνια προκάλεσαν ισχυρές αντιδράσεις στο ACx, ανεξάρτητα από τη βέλτιστη νευρωνική συχνότητα (BF), ενώ οι ειδικές για ξενομοσχεύματα (π.χ., φωνητικές εκφωνήσεις από ωδικά πτηνά ή ινδικά χοιρίδια) συνήθως ολόκληρο τον τονικό χάρτη. Επομένως, εξετάσαμε τις φλοιώδεις αντιδράσεις σε φωνητικές εκφωνήσεις σε ινδικά χοιρίδια (το σφύριγμα που χρησιμοποιήθηκε σε 36 περιπτώσεις συνδέθηκε με 1 δευτερόλεπτο ερεθισμάτων, που παρουσιάστηκε 25 φορές).

Μπορούμε επίσης να προσαρμόσουμε τα παθητικά εξαρτήματα RF σύμφωνα με τις απαιτήσεις σας. Μπορείτε να μπείτε στη σελίδα προσαρμογής για να παρέχετε τις προδιαγραφές που χρειάζεστε.
https://www.keenlion.com/customization/

Εμάλι:
sales@keenlion.com
tom@keenlion.com